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1细胞增殖
常用来检测细胞增殖的方法是CCK8法和Brdu法。CCK8主要通过分光光度计进行检测.OD只越高,说明存活的细胞越多.增殖能力强。Brdu是一种胸腺嘧啶核苷类似物能够在DNA复制时期代替胸腺嘧啶(T)渗入正在合成的DNA分子中.最后通过荧光强度的变化来判定细胞的增殖能力。
2 流式细胞术检测细胞的周期和凋亡
细胞周期指细胞从一次细胞分裂结束到下一次分裂结束为一个周期。细胞周期反应了细胞增殖速度。当细胞生长受到阻滞时流式细胞周期可以判定细胞阻滞于哪个时期。
将Annexin V与PI匹配使用,就可以将处于不同凋亡时期的细胞区分开来。Annexin V标记早期凋亡PI标记晚期凋亡和死亡。
3 细胞划痕实验
细胞划痕实验是研究细胞在体外迁移的方法之一。模拟了细胞在体内愈合过程中的迁移过程。基本步骤包括在细胞单层中创建一个“伤口”.在细胞迁移过程中在开始和定期捕获图像以关闭伤口,以及比较图像以确定细胞迁移速率。
4 克隆形成实验
克隆形成试验是测定细胞增殖能力的有效方法之一,细胞克隆形成率表示接种细胞后贴壁的细胞成活并形成克隆的数量,可以反映细胞群体依赖性和增殖能力两个重要性状。软琼脂克隆形成实验主要用于非贴壁生长的细胞。
5 细胞小室实验
细胞小室实验有细胞侵袭和迁移两种,两种实验的差别主要时侵袭实验增加了基质胶(Matrigel)。滤膜孔径一般为8um而且膜孔都被Matrigel覆盖 细胞不能自由穿过.必须分泌水解酶,并通过变形运动才能穿过这种铺有Martrigel 的滤膜。两种小室都可以考察细胞的运动和侵袭能力。
6 小管形成实验
小管形成实验是测量在体外血管生成一种快速的.可量化的方法,内皮细胞结合条件培养基并接种于基底上易形成三维网状结构。之后通过软件对小管结果进行定是分析。
7 细胞成球实验
成球能力是肿瘤干细胞体外鉴定的一个重要方法,其判断的是单个细胞在合适的条件培养基中自我更新的能力一般用细胞球形成效率(SphereFormation Efficiency.SFE)表示。
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