1、组织化学定义及特征。

组织化学（histochemistry)或细胞化学（cytochemistry）：是基于已知的化学反应，在组织或细胞原位上显示出组织或细胞中的化学物质，并研究其化学性质及功能关系的一门技术。是在形态学的基础上，研究组织或细胞中化学物质的形态、化学成分及定位、定量和代谢状态的学科。

组织化学的特征：应用物理的和化学的方法来查明细胞或组织的化学成分； 用组织学、化学、物理学原理，研究细胞或组织的结构、功能与化学的关系；

对细胞或组织成分的定位、定性、定量的特征进行研究，来认识细胞或组织结构与功能的关系。 具有较强的特异性。

2、组织化学技术的基本要求。

为了能在完好的结构上同时显示其化学物质，组织化学技术必须做到： （1）保存组织（细胞）在生活状态下的结构；

（2）保存组织（细胞）内的生前化学成分、酶活性及检测目的物；

（3）所使用的染色方法是按照已知的化学或物理反应原理进行。

（4）反应产物应在组织结构上形成稳定的有色沉淀物质。

（5）检测手段要有高度的敏感性、特异性和可重复性。

（6）生成物的反应产物必须在原位沉淀，保证定位的精确性及稳定性。

3、组织（细胞）化学基本步骤冰冻切片或石蜡切片等常规处理后，再进行组织（细胞）化学染色，在光镜下观察。

4、组织（细胞）化学染色方法分类。

纯化学方法：Schiff反应法、偶氮偶联法、金属沉淀法、联苯胺反应、四唑盐反应

类化学方法：属某些特殊染色技术，如：Best洋红染色 显示糖原，Baker酸性苏木精染色 显示磷脂，Mayer黏洋红与黏苏木素 显示黏蛋白

物理学方法：1）脂溶染色法2）荧光分析3）放射自显影 物理化学方法等

5、糖类、蛋白质、核酸及脂类物质的常用显示方法。 糖类物质的显示方法：

PAS显示法（Periodic Acid Schiff） 阿利新蓝法（Alcian Blue） 阿利新蓝-PAS复合法（Alcian Blue-PAS） 胭脂卡红法（Carmine method） 甲苯胺蓝法 硫堇法等。

蛋白质显示方法：

1、pH4.2以下的酸性溶液中，用坚牢绿、溴酚蓝、丽春红-2R等酸性染料染色，出现阳性结果表明有蛋白质存在

2、在pH8.0以上的碱性溶液中，用酸性染料染色，呈阳性结果表明含碱性蛋白质

3、若第2步为阴性结果，则改在酸性溶液中用碱性染料（亚甲基蓝）染色。

核酸显示：

1、显示DNA ： Feulgen法试剂：Schiff试剂、盐酸、亚硫酸氢钠 

2、核仁组成区和酸性粘多糖复合显示法：试剂：2%的甲酸、2%的明胶、50%的硝酸银、阿申蓝（8GX）、醋酸溶液

3、粘多糖和核仁组成区双染法试剂：Schiff氏试剂、胶性银液 

4、RNA和DNA的甲绿-派若宁显示法试剂：甲绿、派若宁。

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