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检测细胞增殖的方法很多,MTT、CCK8、BrdU 等等,你知道细胞可以 CFSE 染色用流式来检测细胞增殖么?
CFSE 是一种荧光染料,脂溶性高,易进入细胞,可以与胞内氨基酸发生不可逆的结合,在细胞的分裂过程中能够进入子代细胞,同时荧光强度也变为母细胞的一半,可用流式或荧光纤维镜对其进行分析。
下面我们就开始动手,用流式来检测脾淋巴细胞的增殖。
ConA 储存液:用双蒸水配置终浓度为 1 mg/ml(200×)
CFSE 储存液:用 DMSO 配置终浓度为 5 mM 的 CFSE 溶液(1000×)
收集各组细胞,染色组细胞进行 CD3 表面染色,以对脾细胞中的淋巴细胞的增殖进行检测。流式 FITC 通道分析增殖的脾细胞所占的比例。
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