原理：

细胞凋亡中, 染色体DNA双链断裂或单链断裂而产生大量的粘性3'-OH末端，可在脱氧核糖核苷酸末端转移酶（TdT）的作用下，将脱氧核糖核苷酸和荧光素、过氧化物酶、碱性磷酸酶或生物素形成的衍生物标记到DNA的3'-末端，从而可进行凋亡细胞的检测，这类方法称为脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法（terminal -deoxynucleotidyl transferase mediated nick end labeling, TUNEL）。由于正常的或正在增殖的细胞几乎没有DNA的断裂，因而没有3'-OH形成，很少能够被染色。

应用：

TUNEL是分子生物学与形态学相结合的研究方法，对完整的单个凋亡细胞核或凋亡小体进行原位染色，能准确地反应细胞凋亡典型的生物化学和形态特征，可用于石蜡包埋组织切片、冰冻组织切片、培养的细胞和从组织中分离的细胞的细胞形态测定，并可检测出极少量的凋亡细胞，因而在细胞凋亡的研究中被广泛采用.

实验步骤：

1. 石蜡切片脱蜡至蒸馏水

2.1*PBS洗5min*3次

3.proteinase K 工作液37℃ 30min

4.1*PBS洗5min*3次

5. H2O2 室温 10min

6. 1*PBS洗5min*3次

7. TdT 酶反应液 37℃ 60min 避光

8. 1*PBS洗5min*3次

9. Streptavidin-HRP 液 37℃ 30min 避光

10. 1*PBS洗5min*3次

11. DAB 显色

12. 1*PBS洗5min*3次

13. 苏木素复染后处理封片

14. 全景扫描

具体沟通：400-9688-170

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