脊髓损伤是一种致残率很高的疾病,患者呈逐年上升趋势。脊髓损伤后的病理生理机制非常复杂,由于不能依靠临床开展系统的研究,因而建立理想的动物模型是实验研究的基本前提,目前挫伤型脊髓损伤模型接近人类脊髓损伤的病理生理特点及变化规律,但忽略了持续性的挤压作用。对经典的Allen法进行改进,采用打击并实行加压的方法制备新型挫伤型脊髓损伤模型,模拟临床实际损伤状态。根据不同受压时间对机体产生的损伤,应用BBB运动功能评分观察大鼠脊髓损伤后活动情况,HE染色、甲苯胺兰染色法观察大鼠脊髓损伤后组织学变化,免疫组织化学方法对HMGB1在脊髓损伤中的表达变化进行检测,分析在脊髓损伤不同时期的变化规律,建立稳定的、理想的脊髓损伤动物模型。
大鼠脊髓损伤模型制备方法:
大鼠麻醉后俯卧固定在手术台上,以肋骨为定位标志,暴露T9~T10脊椎,咬除棘突及椎板,暴露脊髓并保持其完整,放置薄塑料垫片在脊髓上,用克氏针沿导管从一定高度处垂直自由下落,打击在垫片上。打击时小鼠出现摆尾反射,双下肢扑动,苏醒后双下肢迟缓性瘫痪,BBB评分(脊髓损伤评分)为0分。造模后每日腹腔注射青霉素预防感染,单笼饲养,每日用Crede手法协助排尿三次。造模3天后,对所有大鼠进行BBB评分;评分结束后处死取脊髓组织。