A:0.5~1% 的伊红酒精溶液:

称取伊红Y 0.5~1 g，加少量蒸馏水溶解后，再滴加冰醋酸直至浆糊状。以滤纸过滤，将滤渣在烘箱中烤干后，以95%酒精(即工业酒精，如果不怕浪费，用无水乙醇配制也可)100毫升溶解。

B:苏木素染液配方:(配制3000 ml，可按比列减少)

苏木精6 g

无水乙醇100 ml

硫酸铝钾150 g

蒸馏水2000 ml

碘酸钠1.2 g

冰醋酸 120 ml

甘油 900 ml

配制方法:将苏木素溶于无水乙醇，再将硫酸铝钾溶于蒸馏水，溶解后将甘油倾入一起混合，最后加入冰醋酸和碘酸钠。

C:1%盐酸酒精分化液:将1毫升浓盐酸加入99毫升70%酒精中即可。

常规he染色步骤

(1)二甲苯(Ⅰ) 15min

(2) 二甲苯(Ⅱ) 15 min

(3)二甲苯:无水乙醇=1:1 2min

(4) 100%乙醇(Ⅰ) 5min

(5) 100%乙醇(Ⅱ) 5 min

(6) 80%乙醇 5min

(7) 蒸馏水 5 min

(8) 苏木精液染色 5 min

(9) 水洗10 min 或流水冲洗5 min

(10) 1%盐酸乙醇 30s

(11) 水洗 30 s

(12)蒸馏水过洗 5 s

(13) 0.5%伊红液染色 1-3 min

(14) 蒸馏水稍洗 30 s

(15) 80%乙醇稍洗 30 s

(16) 95%乙醇(Ⅰ)1 min

(17) 95%乙醇(Ⅱ) 1 min

(18) 无水乙醇 (Ⅰ)3 min

(19)无水乙醇(Ⅱ)3 min

(20)二甲苯(Ⅰ) 3 min

(21)二甲苯(Ⅱ) 3 min

(22)中性树胶封固

冷冻切片HE染色步骤

(1)冰冻切片固定 10~30 s

(2)稍水洗 1~2 s

(3)苏木精液染色(60℃) 30~60 s

(4)流水洗去苏木精液 5~10 s

(5)1%盐酸乙醇 1~3 s

(6)稍水洗 1~2 s

(7)促蓝液返蓝 5~10 s

(8)流水冲洗 15~30 s

(9)0.5%曙红液染色 30~60 s

(10)蒸馏水稍洗 1~2 s

(11)80%乙醇 1~2 s

(12)95%乙醇 1~2 s

(13)无水乙醇 1~2 s

(14)石炭酸二甲苯 2~3 s

(15)二甲苯(Ⅰ) 2~3 s

(16)二甲苯(Ⅱ) 2~3 s

(17)中性树胶封固。

注:第(14)步如果不用石炭酸二甲苯，可改用无水乙醇。

染色结果:细胞核蓝色，胞质、肌纤维、胶原纤维和红细胞呈深浅不一的红色。

注意事项

切片脱水透明 切片经HE染色后，要彻底脱水透明，才能用中性树胶封盖。如果脱水不彻底，封片后呈白色雾状，镜下观察模糊不清，且容易褪色。切片1-2级无水乙醇脱水，也可使用石炭酸二甲苯进行脱水。石炭酸有较强脱水能力，但长时间可使切片脱色，因此要经过多次二甲苯以使石碳酸完全除去。

实验结果

细胞核被苏木精染成鲜明的蓝色，软骨基质、钙盐颗粒呈深蓝色，粘液呈灰蓝色。细胞浆被伊红染成深浅不同的粉红色至桃红色，胞浆内嗜酸性颗粒呈反光强的鲜红色。胶原纤维呈淡粉红色，弹力纤维呈亮粉红色，红血球呈橘红色，蛋白性液体呈粉红色。

着色情况与组织或细胞的种类有关，也随其生活周期及病理变化而改变。例如，细胞在新生时期胞浆对伊红着色较淡或轻度嗜碱，当其衰老时或发生退行性变则呈现嗜伊红浓染。胶原纤维在老化和出现透明变性时，伊红着色由浅变深。

H-E染色评定标准:

(1)切片完整，厚度4-6微米，厚薄均匀，无皱褶无刀痕;

(2)染色核浆分明，红蓝适度，透明洁净，封裱美观。