（1）物品的准备：

超净工作台、酒精灯、废液缸、移液枪、培养瓶或培养皿、15ml离心管、培养基、离心管、二氧化碳培养箱、倒置显微镜、水浴锅、离心机等。

（2）操作步骤：
①从液氮罐中取出冻存管。

②迅速放入37℃恒温水浴锅中，快速摇动冻存瓶，使细胞尽快解冻，约2-3分钟。

③剪开纱布口袋，取出冻存管，用75%酒精擦拭消毒后，净化台内打开盖，用吸管吸出细胞悬液，装入15ml离心管中，再补加2-3ml培养液，吹打使细胞悬浮。

④低速离心(800-1000rpm)离心5分钟。

⑤去除上清后，加入适量培养液重悬细胞后加入培养瓶中，摇匀后即可置于37℃恒温培养箱中培养，次日更换一次培养液后再继续培养。

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