Masson染色是指用两种或三种阴离子染料混合，胶原纤维呈蓝色，肌纤维呈红色。用来显示组织中纤维以及炎性因子的染色方法之一。

Masson染色

Masson法染色原理与阴离子染料分子的大小和组织的渗透有关,分子的大小由分子量来体现,小分子量易穿透结构致密、渗透性低的组织;而大分子量则只能进入结构疏松的、渗透性高的组织。然而淡绿或苯胺蓝的分子量都很大,因此Masson染色后肌纤维呈红色,胶原纤维呈绿色或蓝色,主要用于区分胶原纤维和肌纤维。

实验目的

masson三色染色方法,是胶原纤维和肌纤维的染色方法,能够对组织和病理组织进行胶原结构的观察。

Masson染色用于显示组织中纤维的染色方法之一。

实验耗材和试剂：

Regaud 氏苏木精：苏木精1g，95%酒精10ml，甘油10ml，蒸馏水80ml。

将苏木精加入蒸馏水内加温溶解,冷却后加入酒精和甘油,放数日后即可应用。

Masson丽春红酸性复红液： 丽春红0.7g，酸性复红0.3g，蒸馏水99ml，冰醋酸1ml。

0.2%冰醋酸水溶液： 冰醋酸0.2 ml，蒸馏水100 ml。

1%磷钼酸水溶液：磷钼酸1g，蒸馏水100 ml。

苯胺蓝水溶液：苯胺蓝2g，蒸馏水98 ml，冰醋酸2 ml。

1%光绿水溶液：光绿 1g，蒸馏水100 ml。

Masson三色法步骤

1． 石蜡切片脱蜡至水。

2． 铬化处理或去汞盐沉淀（甲醛固定的组织此步可略）。

3． 依次自来水和蒸馏水洗。

4． 用Regaud苏木精染液或Weigert苏木精液染核5-10min。

5． 充分水洗,如过染可盐酸酒精分化。

6． 蒸馏水洗。

7． 用Masson 丽春红酸性复红液5-10min。

8． 以2%冰醋酸水溶液浸洗片刻。

9． 1%磷钼酸水溶液分化3-5min。

10. 不经水洗,直接用苯胺蓝或光绿液染5min。

11．以0.2%冰醋酸水溶液浸洗片刻。

12．95%酒精、无水酒精、二甲苯透明、中性树胶封固。

结果：胶原纤维、粘液、软骨呈蓝色（如光绿液染色为绿色），胞浆、肌肉、纤维素、神经胶质呈红色，胞核黑蓝色。

注意事项：

1．控制好染色步骤。

2．组织固定起着很重要的作用，根据不同的固定液可延长或缩短染色时间。

3．0.2%冰醋酸水溶液洗，可使色调清晰鲜艳。

4．磷钼酸水溶液对丽春红、酸性复红有分化作用，分化时镜下控制， 肌纤维和纤维素呈红色，胶原纤维呈淡粉红色即可。

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